29 отзывов
Авимед Стандарт
+7 показать номер
+7 показать номер
+7 показать номер

Блоттинг

Блоттинг – это стандартный метод для переноса молекул на поверхность мембраны. Кроме того, блоттинг – это промежуточный этап в процедурах секвенирования белков и элюции белков и нуклеиновых кислот для последующего анализа
Электро-блоттинг ― важный метод переноса, главным образом, белков из полиакриламидных гелей на нитроцеллюлозные (или другие) мембраны. Tank-блоттинг происходит в вертикальных резервуарах, содержащих буферные растворы. На резервуары с двух сторон установлены платиновые электроды. При этой методике гель и мембрана зажаты в рамке между листами фильтровальной бумаги и пористыми пластинами. Обычно перенос происходит в течение 10-12 часов.
Полусухой блоттинг проводится между двумя горизонтальными пластинами- электродами и позволяет провести перенос быстро и равномерно. В отличие от tank-блоттинга, при полусухом переносе используется небольшое количество буферного раствора, и процесс переноса происходит очень быстро, в течение нескольких минут. Кроме того, полусухой блоттинг может использоваться, для мягкого переноса белков с небольшим молекулярным весом и/или для эффективного переноса многокомпонентных смесей белков с широкой дисперсией молекулярных весов.
Перенос нуклеиновых кислот традиционно проводился с помощью капиллярного блоттинга – процедуры, требующей много времени (до 12 часов). Поэтому, в настоящее время для этих целей вместо капиллярного блоттинга используется вакуумный блоттинг. При этом время процедуры сокращается до 15 ― 60 минут.
Dot- и Slot-блоттинги используются для концентрации и иммобилизации образцов (белков и нуклеиновых кислот) на мембранах с использованием вакуумного источника.